Fluorescencia in situ hybridizácia (FISH) je jednou z niekoľkých techník, ktoré sa používajú na vyhľadávanie DNA buniek, hľadajúc prítomnosť alebo absenciu špecifických génov alebo častí génov.
Mnoho rôznych druhov rakoviny je spojených so známymi genetickými abnormalitami. A genetickým, nie sme len hovorili o dedičnosti. Počas celého života môžu bunky robiť chyby, keď sa delia a rastú.
V týchto bunkách sa môžu hromadiť mutácie v DNA, ktoré sú spojené s rakovinou.
Ako pracuje FISH?
FISH je technika, ktorá používa fluorescenčné sondy na detekciu špecifických génov alebo častí génov (sekvencie DNA). Pracovníci laboratória zdravotníckeho centra a onkológovia používajú FISH na posúdenie pacientov, ktorí môžu mať rakovinu, a niekedy aj na sledovanie pacienta, u ktorého už bola diagnostikovaná rakovina a liečená.FISH sa môže uskutočňovať s použitím rôznych typov vzoriek podľa miesta a typu rakoviny, ktorá je podozrivá: nádorové bunky získané z periférnej krvi, biopsie kostnej drene alebo biopsia lymfatických uzlín a tkanivo vložené do formalínového parafínu (to sa týka na vzorku tkaniva, ktoré sa spracúva v laboratóriu a zapracuje sa do typu vosku, čím sa stáva tuhším, takže sa dá rozdeliť na tenké časti a namontovať na mikroskop.
Čo znamenajú písmená?
"H" vo FISH znamená hybridizáciu.
V molekulárnej hybridizácii sa ako sonda použije označená DNA alebo RNA sekvencia – ak si to predstavíte, predstavte červenú tehlu Lego. Sonda sa použije na nájdenie náprotivnej Lego tehly alebo DNA sekvencie v biologickej vzorke.
DNA vo vašom exempláre je ako hromady kociek Lego a väčšina tehál v týchto hromadách sa nezhoduje s našou červenou sondou.
A všetky vaše tehly sú úhľadne usporiadané do 23 párov tehlových hromád – každá hromada je jeden z vašich párových homológnych chromozómov, viac či menej. Na rozdiel od Lego tehál, naša červená Lego sonda je ako silný magnet a nájde svoj zápas bez toho, aby musel triediť cez hromady.
"F" sa týka fluorescencie. Naša červená sonda sa môže stratiť v hromadách tehál, takže je označená farebným fluorescenčným farbivom, takže bude žiariť. Keď nájde svoju zhodu medzi 23 spárovanými hromadami, značka fluorescencie odhalí jeho polohu. Takže teraz môžete vidieť, ako môžu výskumníci a klinickí pracovníci používať FISH, aby pomohli identifikovať, kde (kde hromada, alebo ktorý chromozóm) je daný jednotlivý gén umiestnený.
"I" a "S" znamenajú
in situ . To sa týka skutočnosti, že naša červená Lego tehly hľadá svoj zápasvo vzorke, ktorú ste dali .Čo je to s konkrétnymi rakovinami krvi?FISH a iné
in situ
hybridizačné postupy sa používajú na diagnostiku rôznych chromozomálnych abnormalít – zmeny v genetickom materiáli, zmeny v chromozómoch vrátane nasledujúcich: Vymazanie – časť chromozómu je preč
Translokácia – časť jeden chromozóm sa rozpadne a prilepí sa na iný chromozóm
Inverzia – časť chromozómu sa zlomí a opäť sa vloží späť, ale v opačnom poradí
Duplikácia – časť chromozómu je prítomná v príliš veľa kópiách vnútri bunky
Každý typ rakoviny môže mať vlastnú sadu chromozomálnych zmien a príslušné sondy. FISH nielen pomáha identifikovať počiatočné genetické zmeny v procese ochorenia, ako je rakovina, ale môže byť tiež použitý na sledovanie odpovede na liečbu a odpustenie choroby. Genetické zmeny detegované FISH niekedy poskytujú dodatočné informácie o tom, ako sa rakovina jedinca pravdepodobne správa, na základe toho, čo sa v minulosti pozorovalo u ľudí s rovnakým druhom rakoviny a podobných genetických zmien. Niekedy sa FISH používa už po diagnostikovaní, aby získal ďalšie informácie, ktoré by mohli pomôcť predpovedať výsledok pacienta alebo najlepšiu liečbu.FISH môže identifikovať chromozomálne abnormality v leukémii vrátane chronickej lymfocytovej leukémie (CLL). Pre chronickú lymfocytickú leukémiu / malý lymfocytový lymfóm FISH umožňuje pacientom zistiť ich prognostickú kategóriu: dobrá, stredná alebo slabá. Pri akútnej lymfoblastickej leukémii (ALL) môže genetika leukemických buniek povedať o úrovni rizika rakoviny a pomôcť riadiť terapeutické rozhodnutia.
FISH panely sú tiež dostupné pre lymfóm, mnohopočetný myelóm, poruchy proliferácie plazmatických buniek a myelodysplastický syndróm. V prípade lymfómu z plášťových buniek sa napríklad vyskytuje
translokácia
, ktorú môže detegovať FISH nazývaný GH / CCND1 t (11; 14), ktorý je často spojený s týmto lymfómom.
Prečo FISH? Výhodou FISH je, že sa nemusí robiť na bunkách, ktoré sa aktívne delia. Cytogenetické vyšetrenie zvyčajne trvá približne tri týždne, pretože rakovinové bunky musia rásť v laboratórnych miskách asi 2 týždne predtým, než sa môžu testovať. Na rozdiel od toho výsledky FISH sú zvyčajne k dispozícii v laboratóriu počas niekoľkých dní.
